Revés Transcriptase de Foreasy M-MLV

Nueva generación de Foreasy de enzima Foreasy de Transcriptase RT del revés de M-MLV en venta

Introducción de productos

El revés Transcriptase de Foreasy M-MLV es un nuevo transcriptase reverso expresó en Escherichia Coli dirigió bacterias usando tecnología genética de la recombinación. Es una polimerasa de DNA recombinante que sintetiza un filamento complementario de la DNA del ARN de una sola fila, de la DNA, o de un ARN: Híbrido de la DNA. No tiene ninguna actividad de la ARNasa H, estabilidad fuerte, afinidad fuerte del ARN, y alta sensibilidad de la detección.

Componentes del producto:

Tipo

Almacenamiento

Tienda en -20±5℃ durante 2 años o en -80℃ para el almacenamiento de larga duración.

Uso

síntesis de u del primer filamento del cDNA para RT-PCR y RT-PCR en tiempo real

síntesis del cDNA de u para reproducirse y la expresión.

generación de u de puntas de prueba etiquetadas del cDNA para los microarrays.

análisis del ARN de la extensión de la cartilla de u

Definición de la unidad

Una unidad de M-MLV RT es la cantidad de enzima requerida para incorporar 1 nmole del dTTP [3H] en el minuto 10 en 37°C usando (A) (despegue) 25 oligos polivinílicos como plantilla-cartilla.

Condiciones de la reacción de la unidad

Tris-ácido clorhídrico de 50 milímetros (pH 8,3), 40 milímetros de KCl, 6 milímetros de MgCl2, 1 milímetro DTT, 0,5 milímetros [3H] de dTTP, 0,1 milímetros de polivinílico (A), 0,1 milímetros (despegue) 25 oligos, 0,1 mg/ml BSA, y enzima en el µL 50 para el minuto 10 en 37°C.

Operación:

sintetice el primer cDNA del filamento (el sistema de reacción de 20 μL)

1. Estructura de sistema del RT (los pasos siguientes se deben realizar en el hielo).

1,1 después de descongelar cada compoment, añádalo al tubo de la reacción en el orden del cuadro de siguiente 1

Cuadro 1:

1,2 después del sistema se prepara, mezcla suavemente y centrifugadora brevemente, después realizan la reacción del RT según el abajo en el cuadro 2

Cuadro 2

• Adición del reactivo en el orden como el cuadro siguiente 3 después de que sea fresco en el hielo

Tabla: 3:

1,4 después del sistema preparado, mézclese suavemente y centrifugue brevemente, entonces realizan condiciones de la reacción del RT en el cuadro de siguiente 4

Cuadro 4:

Nota: Al usar la cartilla al azar, la reacción se debe precalentar en 25°C por 10 minutos antes de la reacción del primer paso.

El procedimiento antedicho está para la referencia solamente, y las condiciones reales de la reacción varían dependiendo de la estructura de la plantilla, de las cartillas, del etc.

Después de que se termine la reacción, el producto de la reacción se coloca en el hielo para los experimentos subsiguientes directamente; para el almacenamiento de larga duración, satisfaga para almacenarlo en -20°C o -80°C.