Equipo DE-05011/05012/05013 del aislamiento de la DNA del tejido animal para la purificación Genomic de la DNA

Aislamiento Kit Cat de la DNA del tejido animal. No.DE-05011/05012/05013 para la purificación Genomic de la DNA de las células cultivadas y del animal

Equipo del aislamiento de la DNA del tejido animal

Cat.No.DE - 05011/05012/05013

Para la purificación genomic de la DNA de las células cultivadas y de los tejidos animales

Producto Descprition:

Este equipo utiliza una columna DNA-solamente que pueda atar específicamente la DNA, la proteasa de Foregene y un sistema único del almacenador intermediario. La DNA genomic de alta calidad se puede extraer de las diversas células cultivadas y de los tejidos animales en el plazo de 30 a 50 minutos.

La membrana del gel de silicona DNA-solamente usada en la columna de la vuelta es material único de Foregene el nuevo, que puede atar con eficacia y específicamente a la DNA, y maximiza el retiro del ARN, de las proteínas de la impureza, de los iones y de otros compuestos orgánicos en células. la DNA genomic de alta calidad 5-80μg se puede purificar del tejido 10-50mg.

Componentes del producto:

Features&advantages:

- Ninguna contaminación de la ARNasa: La columna DNA-Solamente proporcionó en el equipo permite quitar el ARN de la DNA genomic sin ARNasa adicional durante el experimento, de tal modo evitando que el laboratorio sea contaminado por la ARNasa exógena.

- Velocidad rápida: La proteasa de Foregene tiene actividad más alta que muestras de tejido similares de las proteasas y de los resúmenes más rápidamente;

- Simple: la operación genomic de la purificación de la DNA se puede terminar en 50 minutos.

- Conveniente: La centrifugación se realiza en la temperatura ambiente, centrifugación 4℃ y la precipitación del etanol de la DNA no se requiere.

- Seguridad: no se utiliza ningún reactivo orgánico.

- Alta calidad: La DNA genomic purificada tiene fragmentos grandes, ningún ARN, ninguna ARNasa, y extremadamente - el contenido bajo del ion, que puede cumplir los requisitos de diversos experimentos.

Usos de la DNA genomic:

La DNA genomic purificó por el equipo del aislamiento de la DNA del tejido animal tiene pureza elevada y se puede utilizar para las operaciones rutinarias de la biología molecular, por ejemplo: digestión de la enzima, polimerización en cadena, hibridación meridional, construcción de la biblioteca y otros experimentos.

Control de calidad de producto:

De acuerdo con el sistema de gestión total de la calidad de FOREGENE, cada lote de equipos del aislamiento de la DNA del tejido animal se prueba estrictamente las épocas múltiples de asegurar la confiabilidad y la estabilidad de la calidad de cada lote de equipos.

Producción y pureza Genomic de la extracción de la DNA:

La producción de la extracción de DNA genomic del tejido animal se relaciona con la fuente del tejido, las condiciones de almacenamiento, el tiempo de almacenamiento, la dosificación y otros factores. La pureza de la DNA genomic obtenida resuelve la operación experimental rutinaria de la biología molecular, y su OD260/280 está entre 1.7-1.9. La producción de DNA genomic extraída usando este equipo se muestra en la tabla siguiente:

Precauciones: (Por favor estar seguro de leer las precauciones cuidadosamente antes de usar el equipo)

- La muestra debe evitar la congelación repetida y el deshielo, si no los fragmentos extraídos de la DNA serán más pequeños y la producción de la extracción será reducida.

- Antes de usar el equipo, para comprobar cuidadosamente si hay precipitación en L1 del almacenador intermediario, el almacenador intermediario L2 y el almacenador intermediario picovatio. Si hay precipitación, disuélvala por favor en 37℃, mezcla mucho antes uso.

- Antes de usar el equipo, esté seguro de comprobar si el WB del almacenador intermediario está añadido con etanol anhidro según las instrucciones. El WB del almacenador intermediario fue añadido con el etanol anhidro 60ml (DE-05011), el etanol anhidro 120ml (DE-05012) y el etanol anhidro 300ml (DE-053013) antes de usar.

- Volumen de elución: El almacenador intermediario EB no debe ser menos que 100μl, si no afectará a la producción de la DNA.

- Recuerde no añadir la ARNasa a cualquier almacenador intermediario.

- Todos los pasos de la centrifugación se centrifugan en la temperatura ambiente (15-25℃) usando una centrifugadora de escritorio.

- Todos los pasos experimentales fueron realizados en la temperatura ambiente (15-25℃).

Almacenamiento y vida útil:

- El equipo se puede almacenar para 12 meses en la temperatura ambiente (15-25℃), o 2-8℃ por un tiempo más largo.

Nota: Si está almacenada en la baja temperatura, la solución es precipitación propensa. Antes de usar, estar seguro de poner la solución en el equipo en la temperatura ambiente por un periodo de tiempo. En caso de necesidad, precaliéntelo en un baño de agua 37℃ por 10 minutos para disolver el precipitado, y mézclelo antes de usar.

- La solución de la proteasa de Foregene tiene una fórmula única y es activa durante mucho tiempo (3 meses) en la temperatura ambiente; su actividad y estabilidad serán mejores cuando está almacenada en 4℃, así que se recomienda para almacenarlo en 4℃, recuerda no almacenarlo en la reserva de -20℃.

Caracteres de la columna DNA-Solamente

*: El sistema mínimo de la elución de 100μl es un volumen recomendado razonable dado en consideración a tarifa y a la concentración de recuperación de la DNA. Si para aumentar la producción de DNA, el volumen del eluído puede ser aumentado apropiadamente; si para aumentar la concentración de DNA purificada, el volumen del eluído se puede reducir apropiadamente en la premisa de sacrificar una parte de la producción de la DNA, tal como usar un sistema de la elución 50μl, para obtener concentraciones más altas de DNA.

Producción y pureza Genomic de la extracción de la DNA

La producción de la extracción de DNA genomic del tejido animal se relaciona con la fuente del tejido, las condiciones de almacenamiento, el tiempo de almacenamiento, la dosificación y otros factores. La pureza de la DNA genomic obtenida resuelve la operación experimental rutinaria de la biología molecular, y su OD260/280 está entre 1.7-1.9. La producción de DNA genomic extraída usando este equipo se muestra en la tabla siguiente:

Nota: Los datos en esta tabla están para la referencia solamente. En la operación real, los datos obtenidos serán levemente diferentes de los datos en esta tabla debido a los factores tales como condiciones de almacenamiento y habilidad de funcionamiento de los materiales usados.

Flujo de trabajo

Guía del análisis de problema

Lo que sigue es un análisis de los problemas que se pueden encontrar en la extracción de la DNA genomic de muestras de tejido, esperando ser útil a sus experimentos. Además, para otros problemas experimentales o técnicos con excepción de instrucciones de la operación y del análisis de problema, hemos dedicado el soporte técnico para ayudarle. Si usted tiene cualesquiera necesidades, éntrenos en contacto con por favor: 028-83360257 o E-Malí: Tech@foregene.com.

Producción baja o ninguna DNA

Hay generalmente los factores múltiples que afectan a la producción de DNA genomic, incluyendo fuente de la muestra, condiciones de almacenamiento de la muestra, el tratamiento previo de la muestra, la manipulación, el etc.

La DNA Genomic no se podía obtener durante la extracción

1. Las muestras de tejido se almacenan o se almacenan incorrectamente durante demasiado tiempo, dando por resultado la degradación de la DNA genomic.

Recomendación: Muestras de tejido de la tienda en nitrógeno líquido o -80°C; intente utilizar nuevamente recogió las muestras de tejido para la extracción genomic de la DNA.

2. Demasiado poco consumo del tejido puede llevar al fracaso para extraer la DNA genomic correspondiente.

Sugerencia: Para las muestras de tejido que se han almacenado durante mucho tiempo o tienen degradación genomic severa de la DNA, la cantidad de muestras de tejido se puede aumentar apropiadamente para extraer la considerable DNA genomic. La cantidad de muestra se puede determinar según necesidades de la DNA, pero no debe exceder 50mg.

3. Almacenamiento incorrecto de los resultados de la proteasa de Foregene en actividad reducida o desactivada.

Recomendación: Confirme las condiciones de almacenamiento de la proteasa de Foregene o substitúyalas por una nueva proteasa de Foregene para la hidrólisis enzimática.

4. El equipo se almacena o se almacena incorrectamente durante demasiado tiempo, haciendo algunos componentes en el equipo fallar.

Recomendación: Compre un nuevo equipo genomic de la extracción de la DNA del tejido animal para las operaciones relacionadas.

5. Uso incorrecto del equipo. Por ejemplo, algunos tejidos necesitan los equipos especiales para procesar.

Recomendación: La compra de un equipo para las muestras, tales como la extracción de la DNA genomic del suelo, requiere la compra de un equipo dedicado del aislamiento de la DNA del suelo.

6. WB del almacenador intermediario sin el adición del etanol anhidro.

Recomendación: Asegúrese de añadir el volumen correcto de etanol anhidro para proteger el WB.

7. El eluyente no fue goteado sobre la membrana de la silicona correctamente.

Sugerencia: Añada el eluyente precalentado en 65°C gota a gota al centro de la membrana del gel de silicona, y déjelo en la temperatura ambiente por 5 minutos para aumentar la eficacia de la elución.

DNA genomic extraída con la producción baja

1. La muestra se almacena o se almacena incorrectamente durante demasiado tiempo, dando por resultado la degradación de la DNA genomic.

Recomendación: Muestras de tejido de la tienda en nitrógeno líquido o -80; intente utilizar nuevamente recogió las muestras de tejido para la extracción genomic de la DNA.

2. Si la cantidad de muestras de tejido es demasiado pequeña, la DNA genomic extraída estará menos.

Sugerencia: Para las muestras de tejido que se han almacenado durante mucho tiempo o tienen degradación genomic severa de la DNA, la cantidad de muestras de tejido se puede aumentar apropiadamente para obtener la considerable DNA genomic. La cantidad de muestra se puede determinar según necesidades de la DNA, pero no debe exceder 50mg.

3. La cantidad excesiva de muestra llevará a la digestión incompleta y a la centrifugación incompleta. La columna de la purificación se puede bloquear durante la centrifugación en la columna, y la DNA genomic extraída estará menos.

Sugerencia: Según diversos tejidos, la dosificación se debe ajustar dentro del magnesio 10-50. Cuando la digestión es incompleta o se bloquea la columna de la purificación, reduzca por favor la dosificación correspondiente del tejido.

4. La muestra no se preprocesa ni se preprocesa incompleto.

Sugerencia: Las muestras especialmente preservadas o algunas muestras relativamente especiales se deben pretratar antes de la hidrólisis enzimática, que puede quitar la solución de la preservación de la muestra o los factores que afectan a actividad de la proteasa, para poder realizar la reacción enzimática de la hidrólisis más a fondo, y la DNA genomic de una producción más alta pueda ser obtenida.

5. Muestras de tejido preservadas especiales, tales como cola parafina-integrado, de rata, etc.

Recomendación: Compre un equipo genomic dedicado de la extracción de la DNA, tal como muestras parafina-integradas, usted puede elegir el equipo del aislamiento de la DNA de FFPE; las muestras de la cola del ratón, usted puede elegir la DNA Mini Kit de la cola del ratón. Estos tejidos se tratan con sus equipos especiales, y la producción de la extracción de la DNA será más alta y el efecto será más ideal.

6. Almacenamiento incorrecto de los resultados de la proteasa de Foregene en actividad reducida o desactivada.

Recomendación: Confirme las condiciones de almacenamiento de la proteasa de Foregene o substitúyalas por una nueva proteasa de Foregene para la hidrólisis enzimática.

7. El problema del eluyente.

Recomendación: Por favor almacenador intermediario EB del uso para la elución; si usando el ddH₂ O u otros eluyentes, asegúrese del pH del eluyente está entre 7.0-8.5.

8. El eluyente no fue añadido gota a gota correctamente.

Sugerencia: Añada por favor el descenso de la elución al centro de la membrana de la silicona y déjelo en la temperatura ambiente por 5 minutos para aumentar la eficacia de la elución.

9. El volumen del eluyente es demasiado bajo.

Sugerencia: Utilice por favor el eluyente para la elución genomic según las instrucciones, por lo menos no menos de la DNA que 100μl.

DNA genomic extraída con de poca pureza

El de poca pureza de la DNA genomic llevará al fracaso o al efecto insatisfactorio de experimentos rio abajo, por ejemplo: la enzima no puede ser cortada, y el fragmento del gen de la blanco no se puede obtener por la polimerización en cadena.

1. Contaminación diversa de la proteína, contaminación del ARN.

Análisis: El almacenador intermediario picovatio no fue utilizado para lavar la columna; El almacenador intermediario picovatio no fue utilizado para lavar la columna a la velocidad correcta de la centrifugación.

Recomendación: Intente asegurarse de que no hay precipitación en el sobrenadante cuando el sobrenadante se pasa a través de la columna; esté seguro de lavar la columna de la purificación con el almacenador intermediario picovatio según las instrucciones, y este paso no puede ser omitido.

2. Contaminación del ion de la impureza.

Análisis: La columna de lavado del WB del almacenador intermediario fue omitida o lavada solamente una vez, dando por resultado la contaminación iónica residual.

Recomendación: Esté seguro de lavarse dos veces con el WB del almacenador intermediario según las instrucciones de eliminar los iones residuales tanto cuanto sea posible.

3. Contaminación de la ARNasa.

Análisis: La ARNasa exógena se añade al almacenador intermediario; resultados incorrectos de la operación del lavado del picovatio del almacenador intermediario en la ARNasa residual, que afecta a operaciones experimentales del ARN rio abajo, tales como transcripción in vitro.

Sugerencia: Los equipos ácidos nucléicos de la extracción de la serie de Foregene pueden quitar el ARN sin ARNasa adicional, y todos los reactivo en equipo del aislamiento de la DNA del tejido animal no necesitan la ARNasa; esté seguro de lavar la columna de la purificación con el almacenador intermediario picovatio según las instrucciones, y este paso no puede ser omitido.

4. Residuos del etanol.

Análisis: Después de lavar la columna de la purificación con el WB del almacenador intermediario, no se realizó ninguna centrifugación vacía del tubo.

Recomendación: Siga las instrucciones para la centrifugación vacía apropiada del tubo.

5. La otra contaminación de las impurezas.

Análisis: Las muestras ahorradas o las muestras especiales no fueron preprocesadas.

Recomendación: Pretrate a fondo la muestra según las instrucciones de funcionamiento.