la enzima de Taq del Caliente-principio es ampliamente utilizada. Comparado con la polimerasa de DNA ordinaria, la enzima de Taq del caliente-principio puede evitar con eficacia una cierta amplificación no específica y la formación de dimeros de la cartilla, y puede mejorar con eficacia el índice de éxito de amplificación del gen de la blanco. Especialmente en el campo de las pruebas genéticas, la enzima de Taq del caliente-principio se ha identificado como estándar obligatorio en la industria, y la polimerasa de DNA ordinaria no debe ser utilizada. Puede ser visto tan del antedicho, enzimas de Taq del caliente-principio son ampliamente utilizado. Actualmente, hay muchas marcas de enzimas de Taq del caliente-principio en el mercado interior, pero no hay muchas enzimas de Taq del caliente-principio con de alta calidad. ¿Hecho frente con tan muchos productos de la enzima de Taq del caliente-principio, cómo debemos elegir?
1. Seleccione la enzima de Taq del caliente-principio con alta eficacia de la amplificación
La eficacia de la amplificación de la polimerización en cadena está estrechamente vinculada al funcionamiento de la enzima de Taq. Después de la buena reacción enzimática de Taq se optimiza un sistema, la eficacia de la amplificación está sobre el 95%, y la gama de la amplificación de la cantidad inicial de la plantilla es ancha. La amplificación satisfactoria puede ser obtenida cuando el contenido del gen de la blanco es bajo, y no es fácil ser envenenado cuando la cantidad de la plantilla es alta, y el período exponencial de la amplificación es largo. Para la enzima de Taq con degradación de las prestaciones, incluso si el sistema de reacción se ha optimizado por muchas veces, la eficacia de la amplificación sigue siendo menos del 90%, la forma de “S” de la curva de la amplificación no es obvia, la cuesta es pequeña, y la curva es plana. Cuando el periodo de la plantilla es bajo, no puede ser amplificado, y cuando el periodo de la plantilla es alto, el efecto de la amplificación no es ideal. Por lo tanto, la selección de polimerasas de DNA con alta eficacia de la amplificación es crucial al éxito de la polimerización en cadena y del qPCR.
2. Enzima selecta de Taq del caliente-principio con poder fuerte de la enzima
El poder enzimático de la enzima de Taq se relaciona con la eficacia de la amplificación. Generalmente, cuanto más fuerte es el poder enzimático de la enzima de Taq del caliente-principio, cuanto más largo es el período del crecimiento exponencial de amplificación de la polimerización en cadena, más típica la curva ‘S-formada’, cuanto más alto es el valor de la señal de la fluorescencia, y el más conveniente para la detección múltiplex de la polimerización en cadena. Las polimerasas de DNA de la marca con poder enzimático débil pueden apoyar generalmente solamente 2 reacciones del plex. Al hacer 3 reacciones del plex, la curva de la amplificación es baja, el valor de la señal de la fluorescencia es bajo, y no hay curva típica de la amplificación, así que los resultados son difíciles de juzgar.
3. Seleccione una enzima de Taq del caliente-principio con alta sensibilidad
Hablando en términos generales, la polimerasa de DNA tiene alta eficacia de la amplificación y alta sensibilidad, pero hay también inconsistencias. Si la abundancia del gen de la blanco de la muestra que se amplificará es baja, se recomienda para probar la sensibilidad de la amplificación de la enzima de Taq. El método de detección más común es realizar el dilución de diez veces o de cinco veces de la pendiente del fragmento del plásmido del gen de la blanco, realiza la detección de la polimerización en cadena en el dilución más bajo, y selecciona la enzima de Taq del caliente-principio con una sensibilidad más alta de la detección.
Puede ser visto del antedicho que los investigadores necesitan elegir según sus propios requisitos experimentales y condiciones de financiamiento. Es el mejor hacer un experimento de la amplificación del dilución de la pendiente para detectar la eficacia de la amplificación y la sensibilidad de la enzima de Taq del caliente-principio.
Un ejemplo de la polimerasa de DNA de Taq de Foregene:
Polimerasa de DNA de Foreasy HS Taq
Descripción
La polimerasa de DNA de Foreasy HS Taq es una polimerasa de DNA expresó en Escherichia Coli que dirige bacterias por tecnología de la recombinación del gen. La enzima se combina con un buffffer único de la reacción, que hace el producto altamente resistente y compatible, y puede utilizar directamente el lysate de la muestra (sistema de la lisis de Foregene) como plantilla para las reacciones de la detección.
Uso
Polimerización en cadena cualitativa y detección cuantitativa de la polimerización en cadena de plantillas purifified y de plantillas no--purifified.
Control de calidad
1. Ninguna actividad exógena de la nucleasa detectó
Método 2.PCR para detectar la DNA genomic residual sin el anfitrión
3.It puede effffectively amplificar genes de la solo-copia en el genoma humano
4.Store en la temperatura ambiente para una semana, cambios noobvious de la actividad
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